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內(nèi)毒素的檢測有傳統(tǒng)的家兔熱原試驗(rabbit pyrogentest,RT)、鱟試驗法(limulus test,LT)以及其他的一些特殊方法。
(一)家兔熱原試驗法
此方法即將一定量的被檢標本靜脈注人家兔體內(nèi),觀察其注射后的發(fā)熱情況,以決定所檢標本中有無熱原存在。RT法為一種定性檢測內(nèi)毒素的方法,應用歷史較久,此方法本身有許多限制,如家兔對內(nèi)毒素在反應上有個體差異﹑敏感度不高、不能定量測出內(nèi)毒素等。
(二)鱟試驗法
細菌內(nèi)毒素檢查法也稱之謂鱟試驗法(LT法)英文為Bacterial Endotoxins Test,它是在1964年由美國學者Levin和Bang所發(fā)現(xiàn),并在1968年正式建立的一種定性或定量檢測微量細菌內(nèi)毒素的分析方法。由于其靈敏度高,特異性強而且操作簡便快捷,目前在許多科研和應用單位均得到了突飛猛進的發(fā)展和推廣應用。自此方法建立以來的30年間,其在細菌內(nèi)毒素本質(zhì)和方法學的研究方面更是不斷進步和發(fā)展,加之各種新型試劑和新型儀器的開發(fā),不僅在藥學,而且在微生物學及臨床檢驗等領域的開發(fā)應用更為廣泛。
LT法又稱鱟變形細胞溶解物試驗(limulus amoebocytelysate,LAL),是目前檢測內(nèi)毒素最敏感的方法。它比RT法敏感10~100倍以上,可測出微量的內(nèi)毒素(0.1 ~ 1ng/ml),用微量光電法及其他改進方法可測到微微克(pg/ml)的水平。而在RT法中,敏感性高的家兔需注射1.5ng/kg 才能引起發(fā)熱,而敏感性低的卻需要注射0.5 ~10μg/kg才能引起發(fā)熱。
LT法可廣泛地用于革蘭氏陰性菌感染的快速診斷,對患者的血液、尿液及腦脊液可進行直接的檢查。此法亦可用于檢查各種注射劑內(nèi)是否有內(nèi)毒素污染。